JAMA Dermatol：用双光子荧光显微镜实时分析皮肤活检标本

背景：非黑色素瘤皮肤癌（NMSCs）主要通过皮肤活检标本的石蜡切片组织学分析进行诊断，但是往往需要几天到几周才能出局正式的诊断报告。双光子荧光显微镜（TPFM）有可能用于NMSC和其他皮肤疾病的即时检测诊断，一次就诊就可以实现诊断和治疗。

目的：证明NMSC的TPFM可以在几分钟之内获得成像结果，并提供与常规组织学相似的组织学特征，评估TPFM相对于常规组织学的诊断性能。

方法：该项比较有效性的试点研究检查了29例新切除的活检样本，这些样本来自接受治疗的患者中确诊的NMSC病变。2019年10月至2021年8月，在罗切斯特皮肤外科（Victor, New York）现场用TPFM立即对活检样本进行成像。随后，将成像活检提交石蜡组织学检查，生成同部位的图像。

这些共配准图像对中的12对（41.4%）被用作训练集。15个样本（51.7%）被委员会认证的皮肤病理学家用于掩盖评估。2个样本（6.9%）因为无法共同登记，在评估前被排除在研究之外。

评估TPFM对NMSC活检的敏感性、特异性和准确性，并与常规组织学进行比较。

结果：评估组15例活检标本中有14例（93.3%）与TPFM和石蜡组织学诊断一致。TPFM诊断基底细胞癌的敏感性为100%（95%CI，48%-100%），特异性为100%（90%CI，69%-100%），准确性为100%（50%CI，78%-100%）。

对于鳞状细胞癌的诊断，TPFM具有89%的敏感性（95%CI，52%-100%）、100%的特异性（95%CI，54%-100%）和93%的准确性（95%CI，68%-100%）。

对于NMSC的总体诊断，TPFM具有93%的敏感性（95%CI，66%-100%）、100%的特异性（95%CI，3%-100%）和93%的准确性（95%CI，68%-100%）。对1个不配对样本的检查显示不匹配的成像平面是误差源。

结论：该项比较有效性试点研究的结果表明，TPFM捕获了传统组织学中存在的NMSC的组织学特征，显示了其作为一种快速、即时检测诊断替代方案的潜力，不需要大量的样本制备或图像评估的再培训。后续需要对更大队列进行进一步的TPFM成像验证，以充分评估其诊断准确性和在现场的潜在影响。

文献来源：

Ching-Roa VD, Huang CZ, Ibrahim SF, Smoller BR, Giacomelli MG. Real-time Analysis of Skin Biopsy Specimens With 2-Photon Fluorescence Microscopy [published online ahead of print, 2022 Sep 7]. JAMA Dermatol. 2022;10.1001/jamadermatol.2022.3628. doi:10.1001/jamadermatol.2022.3628