BMC Complement Med Ther：酒制和炒制菟丝子可通过Keap1-Nrf2/HO-1和PI3K/AKT通路增强H2O2胁迫下KGN细胞的抗氧化应激和细胞凋亡能力

背景：卵巢功能不全(POI)是一种全球性的疾病，特征是不育、闭经或少经、雌激素分泌不足和血清促卵泡激素(FSH)水平升高。颗粒细胞在卵泡生长、增殖、分化、闭锁/排卵和黄体形成中也起着至关重要的作用。颗粒细胞质量影响女性生育能力。然而，目前还没有有效的治疗方法可用于POI，并且这种疾病的发病机制仍然知之甚少。

菟丝子(CS)作为一种抗衰老剂、抗炎剂、止痛药和补阳药在传统中医(TCM)中已有几千年的应用历史。其主要有三种形式：粗制菟丝子(CCS)、酒制菟丝子(WCS)和炒菟丝子(SFCS)。虽然炮制方法调整了菟丝子的疗效，但在临床实践中，CCS、WCS和SFCS难以区分。此外，CCS、WCS和SFCS对POI氧化应激和细胞凋亡的影响尚不清楚。

该研究旨在(1)确定CCS、WCS和SFCS是否能抑制H₂O₂诱导的KGN细胞的氧化应激和凋亡；(2)阐明它们在POI治疗中的作用模式。

方法：采用超高效液相色谱(UPLC)-Q-ExactiveTM - orbitrap -质谱(MS)、氧化应激指标、活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)、实时PCR、Western blotting、分子对接等方法，研究CCS、WCS和SFCS对KGN细胞氧化应激的保护作用及凋亡机制。

结果：CCS、WCS和SFCS预处理可降低H₂O₂诱导的KGN细胞氧化损伤，并伴有ROS水平下降和丙二醛(MDA)积累。CCS、WCS和SFCS上调抗氧化水平(GSH、GSH/GSSG比值、SOD、T-AOC)、线粒体膜电位(MMP)和相对mRNA(Nrf2、Keap1、NQO-1、HO-1、SOD-1、CAT)的表达。

此外，CCS、WCS和SFCS通过上调Bcl-2，下调Bax、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3，降低Bax/Bcl-2比值来抑制细胞凋亡。它们还通过部分激活PI3K/Akt和Keap1-Nrf2/HO-1信号通路发挥抗氧化作用。

结论：该研究结果表明CCS、WCS和SFCS对H₂O₂诱导的KGN细胞氧化应激和凋亡具有抑制作用，其机制可能包括活化Keap1-Nrf2/HO-1、上调P-PI3K、诱导P-Akt介导的PI3K-Akt通路。

此外，该研究表明，WCS和SFCS在POI治疗中的疗效优于CCS，建议使用适当的体内模型来评估这些制剂对这种疾病的相对疗效。在POI研究的基础上，也可以对CCS、WCS和SFCS的常见活性单体组分进行体内外结合研究。

原始出处：

Liang Y, Shi Y, Guo R, et al. Wine- and stir-frying processing of Cuscutae Semen enhance its ability to alleviate oxidative stress and apoptosis via the Keap 1-Nrf2/HO-1 and PI3K/AKT pathways in H2O2-challenged KGN human granulosa cell line. BMC Complement Med Ther. 2024;24(1):189. Published 2024 May 15. doi:10.1186/s12906-024-04491-5